液相色譜儀色譜柱維護(hù)
作者:技術(shù)部 來源:安恒達(dá) 瀏覽: 發(fā)布時(shí)間:2013-04-19 11:19
平衡色譜柱 反相色譜柱在經(jīng)過出廠測試后是保存在乙腈/水中的。請(qǐng)一定確保您所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過程中可能會(huì)干掉，因此在用流動(dòng)相分析樣品之前，應(yīng)使用10－20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱；如果您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽，應(yīng)注意用純水"過渡"。
硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過出廠測試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動(dòng)相，請(qǐng)?jiān)谑褂昧鲃?dòng)相之前用乙醇或異丙醇平衡
如何平衡色譜柱？
平衡過程中，將流速緩慢地提高
用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對(duì)試劑度如果較低，則需要較長的時(shí)間來平衡）
色譜柱的再生 進(jìn)行色譜柱再生時(shí)，應(yīng)使用一個(gè)謙價(jià)的泵，我們建議最好不使用您的高效液相色譜儀上的泵。
表1 建議用來沖洗的溶劑體積
色譜柱尺寸 柱體積 所用溶劑的體積
125-4 1.6ml 30ml
250-4 3.2ml 60ml
250-10 -20ml 400ml
請(qǐng)根據(jù)下表選擇您的再生方法：
極性固定相（如Si，NH2，DIOL基色譜填料）的再生：
正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水
非極性固定相（如反相色譜填料RP－18，RP－8，CN等）的再生：
水→乙腈→氯仿（或異丙醇）→乙腈→水
0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱
注意：
在對(duì)NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時(shí)，由于NH2可能成銨根離子的形式存在，因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。
如果簡單的有機(jī)溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì)，用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
色譜柱的維護(hù)
1．使用預(yù)柱保護(hù)分析柱（硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度）
2．大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2－7.5，盡量不超過該色譜柱的pH范圍
3．避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化
4．流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理
5．如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈，并保存大乙腈中
6．壓力升高是需要更換預(yù)柱的信號(hào)